Иммуноцитохимический скрининг рака шейки матки: p16ink4, Ki67 (назначается дополнительно или вместе с цитологическим исследованием соскобов шейки матки и цервикального канала методом ЖИДКОСТНОЙ ЦИТОЛОГИИ BD SurePath FocalPoint) в Клину

Зачем сдавать этот анализ?

Исследование назначают для дифференциальной диагностики степени тяжести поражения шейки матки.

Подробное описание исследования

Рак шейки матки (РШМ): причины, диагностика, лечение

Рак шейки матки (РШМ) напрямую связан с вирусами папилломы человека (ВПЧ). Особенно опасны типы 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 ВПЧ — это вирусы высокого канцерогенного риска, а также тип 66 — потенциально высокого риска. Если какой-то из вирусов папилломы человека высокого канцерогенного риска находится в организме женщины долгое время (более 2 лет), то вероятность развития РШМ многократно возрастает.

В 70% случаев рака шейки матки при исследовании обнаруживаются 16-й и 18-й типы ВПЧ, в 20% случаев — 31, 33, 45, 52, 58-й типы.

ВПЧ могут негативно влиять на клетки эпителия шейки матки, и это способствует их перерождению в злокачественные клетки. Последовательно, на протяжении 10–15 лет, развиваются цервикальные интраэпителиальные неоплазии (CIN), рак нулевой стадии (преинвазивный рак) и инвазивный РШМ.

Для ранней диагностики (скрининга) рака шейки матки часто используют традиционное цитологическое исследование. Однако результаты этого анализа могут быть как ложноотрицательными, так и ложноположительными.

На сегодняшний день наиболее информативный скрининговый тест — исследование методом жидкостной цитологии BD SurePath FocalPoint соскобов шейки матки и цервикального канала. Результат исследования оценивается по международной классификации Bethesda:

• ASC-US — атипичные клетки есть, но установить CIN нельзя из-за низкого качества материала.
• LSIL (low-grade squamous intraepithelial lesions) — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени. LSIL включает койлоцитоз, CIN I (лёгкую дисплазию) и кондиломы шейки.
• HSIL (high-grade squamous intraepithelial lesions) — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени. HSIL включает CIN II (умеренную дисплазию), CIN III (тяжёлую дисплазию) и преинвазивный рак (CIS). HSIL — предраковое состояние.
• ASC-H — близок HSIL, но точно установить диагноз нельзя из-за низкого качества материала.

При CIN I применяется выжидательная тактика. При CIN III всем женщинам рекомендуют пройти конизацию шейки матки — конусообразное иссечение патологических тканей шейки матки хирургическим путём.

Труднее всего выбрать тактику лечения при CIN II. У большинства пациенток (более чем у 60%) она регрессирует, но у 20–22% пациенток трансформируется в тяжёлую дисплазию CIN III, а у 5% женщин переходит в инвазивный рак шейки матки. При этом процедура конизации, к которой прибегают при лечении дисплазий, может иметь негативные последствия для здоровья женщины: она травмирует шейку матки, нарушает её барьерные функции, что в итоге может способствовать восходящей инфекции. Деструкция шейки матки влияет на репродуктивную функцию женщины: около 30% беременностей заканчивается самопроизвольным абортом.

Для уточнения диагноза, особенно в трудных и сомнительных случаях (CIN II, CIN II+, CIN III), рекомендуется иммуноцитохимическое исследование онкобелков p16 и Ki-67 — чувствительных и специфичных маркеров, ассоциированных с ВПЧ.

Онкобелки p16 (p16INK4a) и Ki-67

Ki-67 — это белок ядра клетки, связанный с клеточным делением (пролиферацией). Он обнаруживается во время активного деления клеток, а в фазе покоя белок не определяется. Увеличение Ki-67 характерно для многих опухолевых процессов. Так, при CIN I рост количества Ki-67 наблюдается в 15–25% случаев, при CIN II — в 70–80% случаев, при CIN III — в 85–90% случаев.

Белок p16 (p16INK4a) регулирует клеточный цикл эпителиальных клеток различных органов (включая шейку матки) и способствует физиологическому старению этих клеток. Повышение уровня данного белка ассоциировано с нарушением деления клеток: его концентрация повышается, чтобы затормозить активную пролиферацию клеток дисплазии. Также повышение p16 — косвенный признак внедрения онкогенных типов ВПЧ в генетический материал клеток эпителия шейки матки: белок p16 можно обнаружить в 16% случаев CIN I, в 64% случаев CIN II, 90% случаев CIN III и 100% случаев инвазивного рака шейки матки.

Для диагностики заболеваний шейки матки важно именно одновременное обнаружение (коэкспрессия) белков p16 и Ki-67. Белок Ki-67 — маркер пролиферации: он указывает на активное деление клеток. P16, напротив, — антипролиферативный маркер: белок тормозит пролиферацию. Это значит, что одновременное их обнаружение в здоровой клетке невозможно: они взаимно исключают друг друга. Если же оба белка, p16 и Ki-67, одновременно обнаруживаются при исследовании, такой результат свидетельствует: нарушилось регулирование деления клеток, вскоре возможна трансформация CIN до следующей стадии развития болезни, корреляция с ВПЧ приведёт к онкогенной трансформации. Практически всегда коэкспрессия p16 и Ki-67 говорит о тяжёлой дисплазии или онкологическом процессе: при CIN II выявляется в 80–100% случаев, при CIN III — практически в 100% случаев.

Особенности и преимущества методики

Определение двойной экспрессии онкопротеинов p16INK4a (ингибитор циклин-зависимых киназ — регулятор клеточного цикла) и Ki-67 (клеточный маркер пролиферативной активности) методом Cintec PLUS (Cintec Сytology PLUS Kit).

Иммуноцитохимический скрининг РШМ с исследованием коэкспрессии белков p16 (p16INK4a) и Ki-67 повышает чувствительность и специфичность полученных результатов, дополняет жидкостное цитологическое исследование шейки матки при следующих результатах:

• ASC-US — атипичные клетки есть;
• ASC-H — близок HSIL — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени, но точно установить диагноз нельзя;
• LSIL — плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени.

Если в дополнение к одному из данных результатов обнаружены белки р16 и Ki-67, велика вероятность предракового состояния. Вероятность обнаружения CIN I (лёгкой дисплазии) — 98%, CIN II (умеренной дисплазии) и CIN III (тяжёлой дисплазии) — 98,1%, рака шейки матки — 100%.

Благодаря результатам исследования лечащий врач может определить степень риска развития злокачественного новообразования и принять решение о дальнейшей тактике ведения пациентки.