FISH анализ перестроек BCL-2 (кровь) в Экажево
FISH анализ перестроек BCL-2 – одно из важнейших направлений в исследовании фоликуллярных лимфом человека. Эта методика позволяет локализовать на индивидуальных хромосомах, в их конкретных участках отдельные гены и специфические последовательности ДНК, которые способствуют развитию лимфомы. Для FISH-исследования используют венозную кровь.
Приём и метод исследования биоматериала
Биоматериал
Вен. кровь
Приём биоматериала
- Можно сдать в отделении Гемотест
- Правила подготовки к анализу
Когда назначают этот анализ?
- Подозрение на фолликулярную лимфому.
- Выбор тактики лечения при подтвержденном диагнозе фолликулярной лимфомы.
Подробное описание исследования
Фолликулярная лимфома или лимфома клеток фолликулярного центра (ЛКФЦ) – опухоль, развивающаяся из зрелых В-лимфоцитов фолликулярных центров лимфатических узлов. Является самым частым вариантом неходжкинских лимфом. По статистике ВОЗ заболеваемость данным типом лимфом в развитых странах доходит до 35% от всех неходжкинских лимфом взрослых. Показатель заболеваемости зависит от географического региона, от этнической и расовой принадлежности больных и составляет в среднем 20 % от всех лимфопролиферативных заболеваний взрослых.
Фолликулярная лимфома трудно диагностируется из-за ее способности маскироваться под обычную фолликулярную гиперплазию (патологическое разрастание тканей). Чаще всего развивается у больных в возрасте после 40 лет и возникает в лимфоузлах. Также может развиваться в селезенке, миндалинах, костном мозге, желудочно-кишечном тракте, коже, яичках, мягких тканях.
Поскольку у заболевания нет яркой симптоматики, больные, как правило, поздно обращаются к врачу и у 80% диагноз лимфома выставляется в тот момент, когда процесс диссеминирован (распространен по всему организму). К этому моменту поражения костного мозга регистрируются у 40% больных. Опухоль разделяют на три степени злокачественности в зависимости от клеточного состава.
Клетки фолликулярной лимфомы всегда экспрессируют пан-В-клеточные антигены CD20, CD79a, PAX-5 и др. У 90% больных ключевым моментом в возникновении опухоли является перенос гена BCL-2 с хромосомы 18 на хромосому 14.
Белки семейства BCL-2, которых на данный момент насчитывается около 20, регулируют апоптоз (клеточную гибель) в ядерных клетках. Семейство включает проапоптотические (BAX, BAK) белки, белки-регуляторы (BH3-only proteins) (BIM, BAD, PUMA, NOXA и др.) и антиапоптотические (BCL2, BCL-XL, MCL1, BCL-B, BCL- w и BCL2A1) белки, многие из которых были выделены и описаны как онкогены.
В результате переноса хромосом ген BCL-2 активируется, что приводит к повышенной продукции белка BCL-2 нормального строения, являющегося ингибитором апоптоза. Клетки с транслокацией t(14:18) накапливаются, приобретают дополнительные мутации, что приводит к их перерождению в злокачественные. Эта же трансляция обнаруживается и при некоторых диффузных крупноклеточных лимфомах.
У больных без трансляции t (14:18) обнаруживают другие транслокации, приводящие к накоплению антиапоптических веществ. Например, у 15% имеется перестройка гена BCL-6. В редких случаях есть перестройка обоих генов.
Одним из важнейших направлений в исследовании фолликулярных лимфом человека является физическое картирование хромосом с помощью флуоресцентной гибридизации in situ (FISH). Эта методика позволяет локализовать на индивидуальных хромосомах и в их конкретных участках отдельные гены и специфические последовательности ДНК, которые могут провоцировать рак.
Для FISH-исследования используют венозную кровь. Особые ДНК-зонды связываются с комплиментарными участками хромосом. Полученные образцы исследуют под флуоресцентным свечением микроскопа, где и выявляются участки хромосом с отклонениями (переносом хромосом).
Источники
- Клинические рекомендации «Фолликулярная лимфома у взрослых», 2016г.
- Мекешкина Е.А. Дифференциальная диагностика фолликулярной гиперплазии лимфатического узла и фолликулярной лимфомы. // Мекешкина Е.А., Суханов С.А., Ложкин Е.А., Кирьянов Н.А. – Здоровье, демография, экология финно-угорских народов, 2018. №1. С.44-46.
- Селезнев А.А. Лимфома из клеток фолликулярного центра: современное состояние и перспективы морфологической диагностики. // Селезнев А.А. – Вестник неотложной и восстановительной медицины, 2007. №4. С.628-631.
- P.Sengupta, S.Chattopadhyay, S.Chatterjee. G-Quadruplex surveillance in BCL-2 gene: a promising therapeutic intervention in cancer treatment. – Drug discovery today, 2017. Aug;22(8):1165-1186. Doi: 10.1016/j.drudis.2017.05.001.
Что ещё назначают с этим анализом?
Подготовка к исследованию
- Кровь сдают утром натощак – после последнего приема пищи должно пройти как минимум 8 часов. Вечером накануне поужинайте легкой нежирной пищей.
- За 2 часа до сдачи крови на анализ нельзя курить, пить кофе и чай, а также фруктовые соки. Допустимо употребление небольшого количества негазированной воды – не сладкой, не соленой, не минеральной.
- В течение 24 часов до анализа крови нельзя употреблять алкоголь. Также, по согласованию с лечащим врачом, необходимо отменить прием лекарственных препаратов.
- За час до исследования избегайте психоэмоционального напряжения, физического напряжения, такого как быстрый подъем по лестнице, бег. Желательно прийти в отделение лаборатории заблаговременно и в течение 10-15 минут до сдачи крови спокойно посидеть.
- Не сдавайте кровь сразу после физиотерапевтических процедур, массажа и инструментальных обследований, таких как УЗИ и рентген, в течение 5-7 дней.
- Если вы контролируете лабораторные показатели в динамике, постарайтесь сдавать каждый анализ в одно и то же время при одинаковых условиях.
Противопоказания и ограничения
Абсолютных противопоказаний нет.
Референсные значения
Отсутствие абберрантных хромосом (хромосом с отклонениями) в исследуемом образце.