FISH анализ транслокации t(14;18) (q32;q21) (кровь) в Экажево

Приём и метод исследования биоматериала

Биоматериал

Вен. кровь

Приём биоматериала

• Можно сдать в отделении Гемотест
• Правила подготовки к анализу

Когда назначают этот анализ?

•    Постановка/верификация диагноза при подозрении на наличие злокачественного заболевания крови, определение прогноза заболевания;

•    В рамках контрольных обследований при "минимальной остаточной болезни" после проведения химиотерапии или пересадки костного мозга;

•    Выбор тактики лечения при подтвержденном диагнозе фолликулярной лимфомы.

Подробное описание исследования

Фолликулярная лимфома (ФЛ) или лимфома клеток фолликулярного центра – опухоль, развивающаяся из зрелых В-лимфоцитов фолликулярных центров лимфатических узлов. Является самым частым вариантом неходжкинских лимфом. Фолликулярная лимфома трудно диагностируется из-за ее способности маскироваться под обычную фолликулярную гиперплазию (патологическое разрастание тканей). Чаще всего развивается у больных в возрасте после 40 лет, реже у лиц моложе 20 лет. Часто процесс генерализованный, с поражением лимфатических узлов, селезенки, костного мозга и, в некоторых случаях, периферической крови. Также может развиваться в миндалинах, желудочно-кишечном тракте, коже, яичках и других мягких тканях.

Поскольку у заболевания нет явной симптоматики, больные, как правило, поздно обращаются к врачу и у 80% диагноз лимфома выставляется в тот момент, когда процесс принимает диссеминированный характер (распространен по всему организму). К этому моменту поражения костного мозга регистрируются у 40% больных.

Транслокация между хромосомами 14 и 18 приводит к слиянию гена тяжелой цепи иммуноглобулина (IgH), расположенного в области хромосомы 14q32, с геном BCL2, расположенным в районе хромосомы 18q21 – t(14;18) (q32; q21) – что является характерным генетическим признаком ФЛ и наблюдается приблизительно в 85–90% случаев. Подобную генетическую аномалию возможно обнаружить с помощью метода флуоресцентной гибридизации in situ (FISH), имеющего отличную диагностическую чувствительность.

FISH – это молекулярно-цитогенетический метод анализа генетического материала в клетке. В исследовании используются короткие последовательности ДНК - зонды, которые являются комплементарными (взаимное соответствие молекул, обеспечивающее образование связей между ними) по отношению к последовательностям ДНК, представляющим объект изучения. Зонды гибридизуются (связываются) с комплементарными (соответствующими) участками исследуемой ДНК и благодаря тому, что они помечены флуоресцентной меткой, позволяют видеть локализацию интересующих генов в составе ДНК или хромосом. В отличие от других цитогенетических методов изучения хромосом, требующих активного деления клетки, FISH можно выполнять на неделящихся клетках, благодаря чему достигается универсальность метода.

Транслокация t(14;18) является ранним событием в фолликулярном лимфомагенезе, именно поэтому данное исследование позволяет как можно быстрее выявить и подтвердить наличие заболевания, особенно в случае получения сомнительных данных от других методов исследований (гистологический анализ, иммунофенотипирование, анализ реаранжировки гена иммуноглобулина). Более того, исследование на t(14;18) также можно использовать для мониторинга ответа на проводимую терапию, для выявления рецидива заболевания, оценки эффективности очистки от клеток ФЛ при сборе аутологичных стволовых клеток для аутологичной трансплантации, а также для определения биологического подтипа ФЛ, что позволит определить прогноз и подобрать оптимальную терапевтическую тактику. Так, подтип ФЛ, не имеющий транслокации t(14;18) (q32; q21), характеризуется отсутствием экспрессии BCL2, возникает вне лимфатических узлов (чаще всего в коже) и имеет более благоприятный прогноз, чем форма заболевания, имеющая данную генетическую аномалию.

Стоит отметить, что данная генетическая аберрация не на 100% специфична для ФЛ, так как ее также можно обнаружить в 20-30% случаев развития de novo диффузной В-крупноклеточной лимфомы.

Выявление цитогенетических аномалий методом FISH является важным аспектом диагностики, определения прогноза и оптимизации лечения заболевания, поскольку данные аномалии напрямую связаны с уникальными клиническими и иммунологическими характеристиками ФЛ, а определенные отклонения могут также влиять на эффективность некоторых методов лечения.

Источники

1.  Клинические рекомендации «Фолликулярная лимфома у взрослых», 2016г.

2.  Мекешкина Е.А. Дифференциальная диагностика фолликулярной гиперплазии лимфатического узла и фолликулярной лимфомы. // Мекешкина Е.А., Суханов С.А., Ложкин Е.А., Кирьянов Н.А. – Здоровье, демография, экология финно-угорских народов, 2018. №1. С.44-46.

3.  P.Sengupta, S.Chattopadhyay, S.Chatterjee. G-Quadruplex surveillance in BCL-2 gene: a promising therapeutic intervention in cancer treatment. – Drug discovery today, 2017. Aug;22(8):1165-1186. Doi: 10.1016/j.drudis.2017.05.001.

4.  Kosmidis, P., Mankel, B., Fend, F. et al. The t(14;18) translocation is absent from endothelial and follicular dendritic cells of follicular lymphoma (FL) and shows heterogeneous presence in preserved FL mantle zones. Diagn Pathol 13, 25 (2018). https://doi.org/10.1186/s13000-018-0703-2.

5.  Keni Gu, Wing C. Chan, Robert C. Hawley; Practical Detection of t(14;18)(IgH/BCL2) in Follicular Lymphoma. Arch Pathol Lab Med 1 August 2008; 132 (8): 1355–1361. doi: https://doi.org/10.5858/2008-132-1355-PDOBIF.

6.  Godon, A., Moreau, A., Talmant, P. et al. Is t(14;18)(q32;q21) a constant finding in follicular lymphoma? An interphase FISH study on 63 patients. Leukemia 17, 255–259 (2003). https://doi.org/10.1038/sj.leu.2402739.

7.  Einerson RR, Kurtin PJ, Dayharsh GA, Kimlinger TK, Remstein ED. FISH is superior to PCR in detecting t(14;18)(q32;q21)-IgH/bcl-2 in follicular lymphoma using paraffin-embedded tissue samples. Am J Clin Pathol. 2005 Sep;124(3):421-9. doi: 10.1309/BLH8-MMK8-5UBQ-4K6R.