FISH анализ транслокации t(4;14) (p16;q32) (костный мозг) в Экажево

Приём и метод исследования биоматериала

Биоматериал

Костный мозг

Приём биоматериала

• Можно сдать в отделении Гемотест
• Правила подготовки к анализу

Когда назначают этот анализ?

•    Постановка диагноза, определение прогноза, распределение на группы риска;

•    В рамках контрольных обследований при «тлеющей» (бессимптомной, минимальной болезни);

•    Выбор тактики лечения при подтвержденном диагнозе множественной миеломы.

Подробное описание исследования

Множественная миелома (ММ или болезнь Рустицкого-Калера) является злокачественной опухолью из плазматических клеток, которые непрерывно делятся, производя миллионы своих копий, и накапливаются в костном мозге, вытесняя нормальные кроветворные клетки и способствуя разрушению костной ткани, также эти клетки продуцируют аномальные белки (парапротеин или М-белок), вызывающие множественные осложнения за счет инфильтрации в ткани и органы. Болезнь имеет системный характер, признаки и симптомы множественной миеломы могут быть различными, на ранней стадии заболевание может протекать бессимптомно. К наиболее характерным проявлениям относятся поражения костей литического характера, приводящие к развитию боли, усиливающейся при движении, и возникновению переломов, почечная недостаточность, гиперкальциемия, анемия, тромбообразование и рецидивирующие инфекции.

Заболевание характеризуется не только значительной неоднородностью клинических характеристик, но и широким спектром возможных генетических отклонений. Использование для исследования миеломных клеток флуоресцентной гибридизации in situ (FISH), позволяет выявлять генетические аномалии у большинства пациентов. FISH – это молекулярно-цитогенетический метод анализа генетического материала в клетке. В исследовании используются короткие последовательности ДНК - зонды, которые являются комплементарными (взаимное соответствие молекул, обеспечивающее образование связей между ними) по отношению к последовательностям ДНК, представляющим объект изучения. Зонды гибридизуются (связываются) с комплементарными (соответствующими) участками исследуемой ДНК и благодаря тому, что они помечены флуоресцентной меткой, позволяют видеть локализацию интересующих генов в составе ДНК или хромосом. В отличие от других цитогенетических методов изучения хромосом, требующих активного деления клетки, FISH можно выполнять на неделящихся клетках, благодаря чему достигается универсальность метода. Данное исследование позволяет обнаружить даже самые небольшие аномальные изменения в генах клеток, что позволяет использовать его в комплексе первоначальных обследований для диагностики ММ.

Транслокации, вовлекающие локус гена тяжелой цепи иммуноглобулина (IgH), и трисомии хромосом с нечетным номером, считаются первичными цитогенетическими аномалиями, возникающими на ранних предраковых стадиях ММ и потенциально участвующими в патогенезе заболевания. Было обнаружено, что среди всех прогностических факторов, описанных для MM, отклонения от нормы, выявленные методом FISH, являются наиболее лучшими прогностическими факторами. Именно поэтому исследование методом FISH имеет большое значение для распределения пациентов с ММ по группам риска.

Так, транслокации t(4;14), t(14;16) и t(14;20), как правило, связаны с неблагоприятным прогнозом заболевания. Для транслокации t(4;14) свойственно наличие гиперактивации двух онкогенов FGFR3 (рецептор фактора роста фибробластов 3) и MMSET (multiple myeloma SET domain protein), в то время как MMSET сверхэкспрессируется во всех случаях t(4;14), избыточная экспрессия FGFR3 наблюдается только у 70% пациентов. Данная генетическая аномалия не может быть обнаружена с помощью традиционной цитогенетики или спектрального кариотипирования, что подчеркивает важность проведения исследования методом FISH. Транслокация t(4;14) наблюдается приблизительно у 15% пациентов ММ, связана с более высокой пролиферацией аномальных белков сыворотки и плазматических клеток, развитием анемии, худшими показателями выживаемости, а также характеризуется неудовлетворительными результатами лечения как при использовании традиционной химиотерапии, так и при назначении схем лечения на основе высоких доз мелфалана. Поэтому пациенты с наличием данной аномалии относятся к группе высокого риска. Однако, применение новых таргетных препаратов (ингибиторы протеасом, моноклональные антитела), индукционной терапии на основе комбинации бортезомиба и дексаметазона с последующей высокодозной химиотерапией мелфаланом и двойной аутологичной трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток могут преодолеть неблагоприятное влияние этих прогностических факторов и повысить выживаемость.

Выявление цитогенетических аномалий методом FISH является важным аспектом диагностики, определения прогноза и оптимизации лечения заболевания, поскольку данные аномалии напрямую связаны с уникальными клиническими и иммунологическими характеристиками множественной миеломы, а определенные отклонения могут также влиять на эффективность определенных методов лечения.

Источники

1.  Клинические рекомендации «Множественная миелома», 2019 год.

2.  NCCN Guidelines for Patients. Множественная миелома, 2019. Доступно по ссылке (25.11.2021): https://www.nccn.org/patients/guidelines/content/PDF/myeloma-russian-patient.pdf.

3.  Abdallah, Nadine et al. “Cytogenetic abnormalities in multiple myeloma: association with disease characteristics and treatment response.” Blood cancer journal vol. 10,8 82. 11 Aug. 2020, doi:10.1038/s41408-020-00348-5.

4.  Abdallah, N., Rajkumar, S.V., Greipp, P. et al. Cytogenetic abnormalities in multiple myeloma: association with disease characteristics and treatment response. Blood Cancer J. 10, 82 (2020). https://doi.org/10.1038/s41408-020-00348-5.

5.  Goldschmidt H, Ashcroft J, Szabo Z, Garderet L: Navigating the treatment landscape in multiple myeloma: which combinations to use and when? Ann Hematol 98: 1–18, 2019. doi: 10.1007/s00277-018-3546-8.

6.  Rajkumar SV: Myeloma today: Disease definitions and treatment advances. Am J Hematol 91(1):90-100, 2016. doi: 10.1002/ajh.24392.

7.  Rajkumar SV, Kumar S: Multiple myeloma: Diagnosis and treatment. Mayo Clinic Proc 91(1):101-119, 2016. doi: 10.1016/j.mayocp.2015.11.007.

8.  Rajkumar SV, Dispenzieri A. Multiple myeloma and related disorders. In: Niederhuber JE, Armitage JO, Doroshow JH, Kastan MB, Tepper JE. Abeloff’s Clinical Oncology. 5th edition. Philadelphia, PA. Elsevier: 2014:1991-2017.

9. National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Clinical Practice Guidelines in Oncology. Multiple myeloma. V.3.2018. Accessed at www.nccn.org on Dec. 7, 2017.

10. Cardona-Benavides, Ignacio J et al. “Genetic Abnormalities in Multiple Myeloma: Prognostic and Therapeutic Implications.” Cells vol. 10,2 336. 5 Feb. 2021, doi:10.3390/cells10020336.

11. Stewart, A K et al. “Diagnostic evaluation of t(4;14) in multiple myeloma and evidence for clonal evolution.” Leukemia vol. 21,11 (2007): 2358-9. doi:10.1038/sj.leu.2404800.

12. Finelli, P., Fabris, S., Zagano, S., Baldini, L., Intini, D., Nobili, L., … Neri, A. (1999). Detection of t(4;14)(p16.3;q32) Chromosomal Translocation in Multiple Myeloma by Double-Color Fluorescent In Situ Hybridization. Blood, 94(2), 724–732. doi:10.1182/blood.v94.2.724.