Серологическая диагностика клещевого боррелиоза: особенности и подводные камни

В Лабораторию Гемотест поступил заказ на выявление антител класса IgG к Borrelia burgdorferi (возбудителю клещевого боррелиоза) методом иммуноферментного анализа.

Клещевой боррелиоз (болезнь Лайма) — это инфекция, которая передаётся человеку при укусе заражённого иксодового клеща. Возбудителями инфекции являются бактерии Borrelia burgdorferi и, реже, B. garinii и B. afzelii. Наиболее заметный симптом острого боррелиоза — мигрирующая эритема: сыпь в форме кольца с ярким центром.

Выполнение данного исследования в Гемотест полностью автоматизировано и выполняется без участия человека. Для выявления антител применяется набор реагентов «Лайм Бест IgG D-1452», содержащий наиболее иммунологически значимые антигены боррелий. Анализируемый биоматериал помещается в планшеты роботизированной станцией Tecan Freedom EVO, а оптическую плотность измеряет планшетный фотометр Multiskan (ThermoFisher Scientific Inc., Финляндия). Результат исследования автоматически передается в лабораторную информационную систему.

Согласно протоколу постановки было установлено:

• значение ОП положительного контрольного образца — ≥ 0.8,
• значение ОП отрицательного контрольного образца — < 0.2,
• критическое значение ОП, на основании которого выполняется интерпретация результата, — 0.202.

В ходе исследования образец биоматериала пациента показал значение ОП=0,002, что позволило интерпретировать результат исследования как отрицательный.

Несмотря на отсутствие клинических признаков клещевого боррелиоза, пациент принял решение повторить анализ крови на антитела IgG к Borrelia burgdorferi ещё в двух лабораториях и получил положительный результат.

Разбор данного клинического случая показал, что в ходе проведения исследования ошибок допущено не было, а главной причиной появления различных результатов стало несовершенство самого метода.

Дело в том, что чувствительность серологического метода на разных этапах развития боррелиоза отличается: в первые дни после заражения она низкая, а спустя 6–8 недель — высокая. Кроме того, при заражении некоторыми вирусными или бактериальными инфекциями, а также на фоне некоторых аутоиммунных заболеваний, иммуноферментный анализ может показать ложноположительный результат.

В этом случае так и произошло: в ходе углублённой диагностики диагноз боррелиоз у данного пациента был исключен.

Выводы

Несмотря на то, что иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела IgM и IgG широко применяется в лабораторной диагностике клещевого боррелиоза, его результаты не могут служить достаточным основанием для постановки или исключения диагноза.

При подозрении на заражение клещевым боррелиозом, помимо выполнения теста на антитела IgM и IgG к Borrelia burgdorferi, рекомендуется:

• Выполнить ПЦР исследование крови на наличие генетического материала Borrelia burgdorferi.
• При получении положительного результата серологического теста сдать анализ на определение специфичности антител IgG или IgM к антигенам боррелий (Western-blot).
• При получении отрицательного результата серологического теста пересдать тест на антитела повторно через 6–8 недель.